(Citometria e rrjedhës, FCM) është një analizues qelizor që mat intensitetin e fluoreshencës së shënuesve të qelizave të ngjyrosura. Është një teknologji e teknologjisë së lartë e zhvilluar bazuar në analizën dhe renditjen e qelizave të vetme. Ai mund të matë dhe klasifikojë shpejt madhësinë, strukturën e brendshme, ADN-në, ARN-në, proteinat, antigjenet dhe vetitë e tjera fizike ose kimike të qelizave, dhe mund të bazohet në koleksionin e këtyre klasifikimeve.
Citometri i rrjedhës përbëhet kryesisht nga pesë pjesët e mëposhtme:
1 Dhoma e rrjedhjes dhe sistemi i lëngjeve
2 Burimi i dritës lazer dhe sistemi i formësimit të rrezes
3 Sistemi optik
4 Sistemi elektronik, ruajtja, shfaqja dhe analiza
5 Sistemi i renditjes së qelizave
Midis tyre, ngacmimi me lazer në burimin e dritës lazer dhe sistemin e formimit të rrezes është matja kryesore e sinjaleve të fluoreshencës në citometrinë e rrjedhës. Intensiteti i dritës së ngacmimit dhe koha e ekspozimit janë të lidhura me intensitetin e sinjalit të fluoreshencës. Lazeri është një burim koherent drite që mund të sigurojë ndriçim me një gjatësi vale, me intensitet të lartë dhe me qëndrueshmëri të lartë. Është burimi ideal i dritës ngacmuese për të përmbushur këto kërkesa.
Ekzistojnë dy lente cilindrike midis burimit të lazerit dhe dhomës së rrjedhës. Këto lente fokusojnë një rreze lazer me një seksion kryq rrethor të emetuar nga burimi lazer në një rreze eliptike me një seksion kryq më të vogël (22 μm × 66 μm). Energjia e lazerit brenda kësaj rreze eliptike shpërndahet sipas një shpërndarjeje normale, duke siguruar intensitet të qëndrueshëm ndriçimi për qelizat që kalojnë nëpër zonën e zbulimit me lazer. Nga ana tjetër, sistemi optik përbëhet nga grupe të shumta lentesh, vrimash dhe filtrash, të cilët mund të ndahen afërsisht në dy grupe: në rrjedhën e sipërme dhe në rrjedhën e poshtme të dhomës së rrjedhës.
Sistemi optik përpara dhomës së rrjedhës përbëhet nga një lente dhe vrimë. Funksioni kryesor i thjerrëzës dhe vrimës së gjirit (zakonisht dy lente dhe një vrimë gjilpëre) është të përqendrojë rrezen lazer me një seksion kryq rrethor të emetuar nga burimi lazer në një rreze eliptike me një seksion kryq më të vogël. Kjo shpërndan energjinë e lazerit sipas një shpërndarjeje normale, duke siguruar intensitet të qëndrueshëm të ndriçimit për qelizat në të gjithë zonën e zbulimit të lazerit dhe duke minimizuar ndërhyrjen nga drita e humbur.
Ekzistojnë tre lloje kryesore të filtrave:
1: Filtri i kalimit të gjatë (LPF) - lejon që të kalojë vetëm drita me gjatësi vale më të madhe se një vlerë specifike.
2: Filtri me kalim të shkurtër (SPF) - lejon që të kalojë vetëm drita me gjatësi vale nën një vlerë specifike.
3: Filtri i brezit (BPF) - lejon që drita të kalojë vetëm në një gamë të caktuar gjatësi vale.
Kombinime të ndryshme filtrash mund të drejtojnë sinjale fluoreshence në gjatësi vale të ndryshme në tubat individualë të fotoshumëzuesit (PMT). Për shembull, filtrat për zbulimin e fluoreshencës së gjelbër (FITC) përpara PMT janë LPF550 dhe BPF525. Filtrat e përdorur për të zbuluar fluoreshencën portokalli-kuqe (PE) përpara PMT janë LPF600 dhe BPF575. Filtrat për zbulimin e fluoreshencës së kuqe (CY5) përpara PMT janë LPF650 dhe BPF675.
Citometria e rrjedhës përdoret kryesisht për klasifikimin e qelizave. Me avancimin e teknologjisë kompjuterike, zhvillimin e imunologjisë dhe shpikjen e teknologjisë së antitrupave monoklonale, aplikimet e saj në biologji, mjekësi, farmaci dhe fusha të tjera po bëhen gjithnjë e më të përhapura. Këto aplikacione përfshijnë analizën e dinamikës së qelizave, apoptozën e qelizave, tipizimin e qelizave, diagnostikimin e tumorit, analizën e efikasitetit të barnave, etj.
Koha e postimit: 21 shtator 2023
